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Leagene細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一種采用經(jīng)典的碘化丙啶染色(PI staining)方法進(jìn)行細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡分析的檢測(cè)試劑盒,碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一種可以嵌合到雙鏈DNA和RNA的堿基對(duì)中并與之結(jié)合的熒光染料,無堿基特異性。碘化丙啶與雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光,并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比；細(xì)胞內(nèi)的DNA被Propidium Iodide染色后可以用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測(cè)定,然后根據(jù)DNA含量的分布情況,可以進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的分析；碘化丙啶染色后假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2,正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1～2之間。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片斷在染色過程中丟失,因此凋亡細(xì)胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染,即熒光強(qiáng)度小于1,在流式檢測(cè)的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰,即凋亡細(xì)胞峰。

細(xì)胞凋亡時(shí)流式細(xì)胞檢測(cè)可呈現(xiàn)亞二倍體核型的特征,根據(jù)光散射的特點(diǎn),PI染色可以區(qū)分細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死的細(xì)胞峰型,細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)凋亡細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、核碎裂,產(chǎn)生凋亡小體,使細(xì)胞的前向光散射低于正常；在細(xì)胞凋亡的早期,細(xì)胞對(duì)前向角光散射的能力顯著降低,對(duì)側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化；在細(xì)胞凋亡的晚期,前向和側(cè)向光散射的信號(hào)均降低；細(xì)胞壞死時(shí)細(xì)胞多表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹,因此前向光散射高于正常,對(duì)側(cè)向光散射高于正常。

Leagene Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè),亦可用于區(qū)分細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死,其檢測(cè)細(xì)胞含量范圍一般為0.1～1×10⁶之間。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。