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服務(wù)介紹：

       植物硝態(tài)氮檢測(cè)試劑盒(水楊酸比色法)檢測(cè)原理是在濃酸條件下，NO₃^-與水楊酸反應(yīng)生成硝基水楊酸，后者在堿性條件下呈黃色，其顏色深淺與氮含量在一定范圍內(nèi)呈正比，以分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測(cè)定410nm處吸光度，根據(jù)NO₃^-的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣品的硝態(tài)氮含量，該試劑盒主要用于測(cè)定植物組織中的硝態(tài)氮含量。

實(shí)驗(yàn)流程：

①植物樣品：取植物組織1g，清洗干凈，擦干，剪碎成1~2mm的碎片，加入10ml蒸餾水，沸水浴中提取30min，取出后用自來水冷卻至室溫，中速濾紙過濾，補(bǔ)蒸餾水至10ml，即為硝態(tài)氮提取液。

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，用于硝態(tài)氮的檢測(cè)。

③高活性樣品：如果樣品中含有較高濃度的硝態(tài)氮，可以使用硝態(tài)氮裂解液或蒸餾水等進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尯笤傩袦y(cè)定。

1、 配制水楊酸工作液：按水楊酸：濃硫酸=1g：20ml的比例，把水楊酸溶解于濃硫酸，4℃避光保存

2、 配制NO3- Assay Buffer(1×)：用蒸餾水將NO3- Assay Buffer(2×)稀釋一倍即可。

3、 配制系列NO3-標(biāo)準(zhǔn)溶液：取NO3-標(biāo)準(zhǔn)(200μg/ml)按下表加蒸餾水稀釋：

        4、 NO3-加樣：按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入

         5、NO3-測(cè)定：冷卻至室溫，以空白管調(diào)零，分光光度計(jì)(1cm光徑比色杯)或酶標(biāo)儀測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管410nm處吸光度(記為A標(biāo)準(zhǔn)、A測(cè)定)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運(yùn)輸要求：

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜（GLU檢測(cè)請(qǐng)勿全血樣本放置過夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

可用肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清：標(biāo)本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗(yàn)，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！