有氧化物質(zhì)存在下核黃素被光還原，在有氧條件下，被還原的核黃素極易再氧化產(chǎn)生超氧陰離子自由基(O2-)，O2-可將氮藍四唑還原為藍色的甲腙，后者在560nm處有強吸收，而SOD可清除超氧陰離子(O2-)，從而抑制了甲腙的形成。于是光還原反應后，反應液藍色愈深，說明SOD活性愈低，反之酶活性愈高，據(jù)此通過酶標儀比色分析就可以計算出樣品中總超氧化物岐化酶活性水平。本方法是利用SOD抑制NBT在光照下的還原作用來確定酶活性大小，可用于檢測植物、組織、細胞、血清或其它樣品中SOD活性。
價格：￥15.00
規(guī)格：反應
貨號：ST1405
品牌：LEAGENE
服務介紹：
有氧化物質(zhì)存在下核黃素被光還原，在有氧條件下，被還原的核黃素極易再氧化產(chǎn)生超氧陰離子自由基(O2-)，O2-可將氮藍四唑還原為藍色的甲腙，后者在560nm處有強吸收，而SOD可清除超氧陰離子(O2-)，從而抑制了甲腙的形成。于是光還原反應后，反應液藍色愈深，說明SOD活性愈低，反之酶活性愈高，據(jù)此通過酶標儀比色分析就可以計算出樣品中總超氧化物岐化酶活性水平。本方法是利用SOD抑制NBT在光照下的還原作用來確定酶活性大小，可用于檢測植物、組織、細胞、血清或其它樣品中SOD活性。
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
ST1405 | 總超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒 | 反應 | 15 |
實驗結(jié)果展示：
實驗流程：
(1) 樣本接收：血清、血漿、透明液體狀樣本、組織勻漿、植物等
(2)實驗步驟：
1.準備SOD標準品：將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：200、100、50、20、10、5、2U/ml，各取20μl參考樣品進行檢測。
2.選取合適的光源：在光照培養(yǎng)箱或日光燈下，用光度儀測定光度值為3500~4000Lx的適合光照反應的位置，做出標記。
3.配制NBT工作液：將Met緩沖液與NBT溶液按23:3的比例混合。
4.SOD加樣：用96孔板設置空白對照孔、光照對照孔、測定孔，在低光強條件下加入待測樣品和其它各種溶液，加入FD溶液后充分混勻。
5.SOD測定:混勻，取空白對照孔置于暗處，其他各孔置于4000Lx日光下反應20min；反應結(jié)束后，以不照光的空白對照孔調(diào)零，用酶標儀測定560nm處吸光度。
送樣運輸要求：
1、動植物組織樣本(干冰運輸)
準確稱取動物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進行測定。
2、血清樣本(干冰運輸)
全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜（GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心，然后檢測。
3、血漿樣本(干冰運輸)
可用肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心，然后檢測。
4、細胞樣本
貼壁細胞：將細胞用PBS沖洗2次后，用細胞刮將細胞小心刮下來，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。
懸浮細胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。
細胞上清：標本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實驗，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。
僅供科研用途，不可用于臨床診斷！
