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 服務(wù)介紹：

    還原糖檢測試劑盒(斐林比色法)主要由酒石酸鈉鉀、硫酸銅等組成，其測定原理是還原糖具有醛基和酮基，在堿性溶液中煮沸能把斐林試劑中的Cu2+還原成Cu+，使藍(lán)色的斐林試劑脫色，脫色程度與溶液中還原糖含量成正比，在590nm下可用比色法測定吸光度，查標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣品中還原糖的含量，主要用于含淀粉食品、酒精飲料、碳酸飲料、肉制品、蜜餞等食品和植物等樣品中還原糖的定量檢測，總糖的含量也可以測定，但需要提前水解后才能檢測，也可用于還原糖的定性試驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)流程：

1、配置斐林試劑。

2、配置pH中和液(1×)。

3、樣品中還原糖的提?。?/span>

1)固體樣品(如含淀粉食品、植物樣品等)：稱取粉碎或混勻后的試樣10~20g（精確到0.01g），置于250ml容量瓶，當(dāng)體積接近150ml時(shí)滴加1~3滴甲基紅指示劑，如呈紅色可用pH中和液調(diào)至微黃色；若用風(fēng)干樣品，可稱取3g直接加入容量瓶，加入少量水濕潤后再加水至150ml左右加入指示劑和中和液；將容量瓶置于80℃的恒溫水浴中保溫30min，期間搖動(dòng)數(shù)次，以便將還原糖充分提取出來。

2)酒精飲料：稱取混勻后的試樣100g(精確到0.1g），置于蒸發(fā)皿上，滴加1~3滴甲基紅指示劑，用pH中和液調(diào)至微黃色，在水浴上蒸發(fā)至原體積的1/4后，移入250ml容量瓶，置于80℃的恒溫水浴中保溫30min，期間搖動(dòng)數(shù)次。

3)碳酸飲料：稱取混勻后的試樣100g(精確到0.1g），置于蒸發(fā)皿上，在水浴上微微攪拌除去二氧化碳后，移入250容量瓶，用水洗滌蒸發(fā)皿并入容量瓶，加水至刻度，混勻后備用。

4)總糖的水解和提?。?/span>稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，沖洗液也轉(zhuǎn)移至燒瓶中，向三角燒瓶中加入10ml  6M鹽酸溶液，搖勻，煮沸30min，并不時(shí)攪拌；取2滴加于小離心管，再滴加1滴碘液，檢查水解是否完全，如已經(jīng)水解完全，則不顯示藍(lán)色；水解完畢后冷卻至室溫，滴加6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH接近中性；含蛋白質(zhì)較多的樣品參考上述方法，濾液或上清液用蒸餾水定容至100ml，混勻，取10ml，用蒸餾水定容至100ml，搖勻備用。

3、制作還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：按下表設(shè)置空白管(0號(hào))、梯度標(biāo)準(zhǔn)管(1~6號(hào))，按順序依次加入。

將各管混勻后，用沸水浴加熱15min，冷水或自來水冷卻，2500r/min離心5~10min，取上清，1cm比色皿，空白管調(diào)零，用分光光度計(jì)測590nm的吸光度值，以各標(biāo)準(zhǔn)管吸光度為縱坐標(biāo)、對應(yīng)葡萄糖含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4、樣品還原糖的測定：吸取準(zhǔn)備好的還原糖提取液3ml，加入2ml斐林試劑，混勻，沸水浴加熱15min，冷卻、離心、取上清、測定等操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線，空白管調(diào)零后用樣品管的吸光度值帶入回歸方程即可計(jì)算出樣品中還原糖的含量。

 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：全自動(dòng)生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

鑒定結(jié)果：

還原性糖(如核糖、葡萄糖、果糖等)呈磚紅色沉淀，非還原性糖(蔗糖、淀粉等)無顏色變化。

送樣運(yùn)輸要求：

植物樣本干冰運(yùn)輸，食品樣本具體以食物存儲(chǔ)方式運(yùn)輸。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！